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    MKbio 5-Fluoroorotic acid monohydrate (5-FOA) 5-氟乳清酸一水合物
    目錄號 MF2522-500MG 售價 316.00元
    規格 500mg 運輸溫度 冰袋運輸
    其他名稱 5-fluoro-2,6-dioxo-1,2,3,6-tetrahydropyrimidine-4-carboxylic acid; 5-Fluorouracil-4-carboxylic acid; 保存溫度 -20℃干燥保存
    CAS號 220141-70-8 有效期 2年
    應用 酵母反選擇試劑(反篩選藥物) 訂購數量
    產品簡介:

    5-Fluoroorotic Acid (5-FOA) 5-氟乳清酸


    搜索關鍵詞:

    5-FOA 5-氟乳清酸;URA3基因;Orotine-5'-monophosphate (OMP) decarboxylase;Counter-selection agent反選劑;CAS:703-95-7;

     

    產品描述:

    5-氟乳清酸(5-Fluoroorotic Acid,5-FOA)用于酵母反選是一種常用的分子遺傳篩選方法。酵母菌質粒清除、質粒穿梭、等位置換和雙雜交篩選都會用到5-FOA。5-FOA自身對酵母細胞無毒,但功能型URA3基因能編碼表達乳清酸核苷-5′-單磷酸脫羧酶(OMP脫羧酶),將其轉化為有毒形式(如5-氟尿嘧啶),從而使得酵母細胞無法生長。因此,在添加尿嘧啶的5-FOA培養基中,攜帶URA3突變基因的酵母菌能正常生長。5-FOA主要用于釀酒酵母Saccharomyces cerevisiae(URA3)的鑒定和篩選,雖然曾用于其他菌株,包括粟酒裂殖酵母Schizosaccharomyces pombe(URA4 and URA5),白色念珠菌Candida albicans(URA3)和大腸桿菌E. coli(pyrF)。酵母雙雜交系統中5-FOA的使用允許構建激活結構域雜交文庫來鑒定蛋白-蛋白相互作用。

     

    產品應用:

    1. 檢測酵母URA3基因表達;

    2. 構建酵母雙雜交文庫;

    3. 其他酵母遺傳學領域包括基因替換,可移動遺傳因子分析和基因突變鑒定研究。

     

    重要參數

    1) CAS NO:703-95-7, 220141-70-8, 207291-81-4

    2) 同義名:5-fluoro-2,6-dioxo-1,2,3,6-tetrahydropyrimidine-4-carboxylic acid; 5-Fluorouracil-4-carboxylic acid; 5-Fluoro orotic acid; 2,6-Dihydroxy-5-fluoropyrimidine-4-carboxylic acid;

    3) 純度:≥98%

    4)外觀:類白色至淡黃色粉末

    5)熔點:~258°C(高溫非常穩定,如煮沸和高壓滅菌)

    6)溶解性:溶于DMSO,微溶于水,乙醇,甲醇

     

    使用方法

    一、5-FOA培養基配置方法(以粉末形式)

    1.1 配制400ml標準的酵母合成培養基,并加入1g 5-FOA(#MF2521)粉末,充分溶解混勻,0.22μm濾膜過濾除菌?!净蛘呖僧敻邏簻缇臉藴逝囵B基冷卻到55oC后再加入1g 5-FOA粉末,然后過濾除菌?!?/span>

    1.2 高壓滅菌瓊脂粉/水混合液(濃度為20g/600ml),使其冷卻到55oC。

    1.3 將溫熱的5-FOA培養液倒入瓊脂粉/水溶液內,攪勻后,倒平板。


    二、5-FOA培養基配置方法(以儲存液形式)

    2.1 取100mg 5-FOA凍干粉,用1ml無水DMSO充分溶解,配制成100mg/ml(100×)的儲存液。短期頻繁使用,置于4oC避光保存;長期保存,根據單次用量分裝凍存,-20oC保存6個月有效。

    2.2 根據實驗室認可的方法,配制標準的酵母合成培養基(含瓊脂粉),高壓滅菌。放入轉子一起滅菌以便后續攪勻組分用。

    2.3 冷卻到55oC后加入任何熱敏感組分(氨基酸,糖類或者其他成分)。

    2.4 每升培養基加10ml100×5-FOA儲存液,混勻后,倒平板。


    常見問題(FAQs):

    Q1. 如何保存5-FOA?

    A1. 5-FOA粉末可置于4°C短期保存,-20°C長期保存。根據產品特性溶解配置儲存液,需避光置于4°C短期保存。小量分裝后-20°C長期保存,可穩定保存6個月。

    Q2. 5-FOA選擇性培養基pH是多少?

    A2.大于pH 4.5條件下5-FOA選擇性被破壞,唯一的問題在于質子化形式的FOA會滲透進入細胞。一般情況標準配方配置的平板pH=2.8。在pH=6或6.2時5-FOA完全無活性,pH =5.4時5-FOA活性很好,pH=4或更低時5-FOA活性達到100%。正常情況配置5-FOA培養基不用調pH。

    Q3.預制的5-FOA選擇性平板能保存多久?

    A3.絕大多數實驗室保存5-FOA預制平板數月(3-6個月)。有的實驗室數據顯示能放9個月和>12個月(4°C存放),圈上封口膜防止干燥。

    Q4. 5-FOA使用濃度?

    A4. FOA(1mg/ml)在酵母分子遺傳學中常用作選擇性試劑;在Ura+細胞群體重篩選出Ura-細胞;篩選釀酒酵母菌乳清酸核苷-5′-單磷酸脫羧酶(OMP脫羧酶)突變株。FOA(0.1mg/ml)用來正篩選尿嘧啶營養缺陷型的硫依賴型嗜熱古細菌(Sulfolobus acidocaldarius)。

     

    訂購信息:

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    產品名稱

    規格

    價格(元)    

    5-Fluoroorotic Acid (5-FOA) 5-氟乳清酸

    MF2521-1G

    1g

    386

    5-Fluoroorotic Acid (5-FOA) 5-氟乳清酸

    MF2521-5G

    5g

    1386

    5-Fluoroorotic acid monohydrate (5-FOA) 5-氟乳清酸一水合物  

    MF2522-500MG

    500mg          

    316

    5-Fluoroorotic acid monohydrate (5-FOA) 5-氟乳清酸一水合物

    MF2522-1000MG   

    1g

    556

     

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    2)本站所有產品僅做科研用,不能用作臨床診斷和醫療診治用途。

     

     — —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

     

     

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